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大鼠Ⅲ型前膠原(PCIII)ELISA檢測試劑盒現貨組成：

注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、5、10、20、40、80 ng/mL

檢測前準備工作：大鼠Ⅲ型前膠原(PCIII)ELISA檢測試劑盒現貨

1） 請提前20分鐘從冰箱取出試劑盒，平衡至室溫。

2） 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能會有結晶，屬于正常現象；放置室溫，輕搖均勻，待結晶溶解后再配置洗滌液。可將20ml濃縮洗滌液用蒸餾水或離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液，未用完的放回-4℃。

3） 20x洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20x洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

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