【摘要】：轉化生長因子β2（TGF-β2）是一種細胞外糖基化蛋白，屬于轉化生長因子β（TGF-β）超家族成員。它通過I型和II型受體（TGFβR1和TGFβR2）介導信號傳導，在細胞遷移、增殖、分化、胚胎發育、免疫調節及組織修復等生理過程中發揮關鍵作用。TGF-β2的信號傳導主要通過下游SMAD蛋白的磷酸化實現，調控目標基因表達。其生物學功能廣泛，包括抑制免疫細胞過度活化、促進細胞外基質合成、參與胚胎發育中的器官形成和組織模式化，以及在傷口愈合中調節炎癥反應和新生血管形成。

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牛轉化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒組成

操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

技術小提示：

1）加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，避免產生氣泡。加樣時間宜控制再10分鐘內。

2）可用洗板機洗板，每一步洗滌充分都是實驗的根本。

3）根據實際顯色情況酌情縮短或延長孵育時間，但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度的時候即可終止。

4）終止液的加入順序應盡量與底物溶液的加入順序相同。

5）實驗完畢后將未使用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至保質期。

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