人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA檢測試劑盒檢測原理：

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被前列腺素F2α（PGF2α）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的前列腺素F2α（PGF2α）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

自備物品：

1.      酶標儀（450nm）

2.      高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.      37℃恒溫箱

人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA檢測試劑盒實驗注意事項：

1.     樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染。要注意避免出現溶血

2.     本公司提供的96孔酶標板是單條可拆卸型酶標板，用戶按需求使用；剩余的酶標板請按保存條件貯存。在操作過程中避免酶標板干燥，干燥會使酶標板上生物成份迅速失活。

3.     洗板不正確能夠導致不的效果。在加入底物盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔單調掉。

4.     任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的激烈氣體。任何漂白成份都會損壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

樣品收集、處理及保存：

1.  細胞培養上清：適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

2.  細胞：用PBS反復洗滌細胞3次，調整細胞濃度達到104-106/ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內成份，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。

3.  血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。

4.  血漿：應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

5.  體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

6.  組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。

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