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產品介紹
| 品牌 | 軒澤康 | 規格 | 96T,48T |
|---|---|---|---|
| 供貨周期 | 現貨 | 主要用途 | 僅用于科學研究,不得用于臨床 |
| 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 | 保質期 | 6個月 |
| 保存條件 | 2-8℃ | 檢測方法 | 雙抗一步夾心法 |
| 檢測波長 | 450nm | 樣本類型 | 血清、血漿、細胞上清液等 |
| 特色服務 | 免費代測，支持定制 |
檢測原理：試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被豬藍耳病（PRRS）病毒抗原的包被微孔中，依次加入標本、HRP標記的檢測抗原，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較，從而判定標本中豬藍耳病抗體（PRRS-Ab）病毒的存在與否。
樣品收集、處理及保存方法：
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠藍耳病抗體(PRRS-Ab)ELISA檢測試劑盒組成：
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無 |
陰性對照 | 0.5mL | 0.5mL | 無 |
陽性對照 | 0.5mL | 0.5mL | 無 |
檢測抗原-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
小鼠藍耳病抗體(PRRS-Ab)ELISA檢測試劑盒操作步驟：
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置陰、陽性對照孔和樣本孔，陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL；
3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加稀釋液40μL；
4. 隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗原100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
技術小提示：
1. 當混合或重溶蛋白溶液時，盡量避免起沫。
2. 為了避免交叉感染，配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。
3. 每次孵育時，請正確使用封板膠可保證結果的準確性。
4. 混合后的顯色底物在上板前應為無色，請避光保存；假如微孔板后，將由物色變成不同深度的藍色。
5. 終止液上板順序應同顯色底物上板順序一致；加入終止液后，孔內顏色由藍變黃；若孔內有綠色，則表明孔內液體未混勻；請充分混合。
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